凱氏定氮儀是根據蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理,通過(guò)測定樣品中總氮含量從而計算蛋白質(zhì)含量的儀器。因其蛋白質(zhì)含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱(chēng)為凱氏定氮儀,又名定氮儀、蛋白質(zhì)測定儀、凱氏蒸餾儀、粗蛋白測定儀等。由于技術(shù)的不斷進(jìn)步,現有自動(dòng)凱氏定氮儀及全自動(dòng)凱氏定氮儀,自動(dòng)化解決人力問(wèn)題,減少誤差,節省成為也提高工作效率。
凱氏定氮儀原理
將有機化合物與硫酸共熱使其中的氮轉化為硫酸銨。在這一步中,經(jīng)常會(huì )向混合物中加入硫酸鉀來(lái)提高中間產(chǎn)物的沸點(diǎn)。樣本的分析過(guò)程的終點(diǎn)很好判斷,因為這時(shí)混合物會(huì )變得無(wú)色且透明(開(kāi)始時(shí)很暗),在得到的溶液中加入少量氫氧化鈉,然后蒸餾,將銨鹽轉化成氨。而總氨量由樣本的含氮量直接決定會(huì )由反滴定法確定:冷凝管的末端會(huì )浸在硼酸溶液中。氨會(huì )和酸反應,而過(guò)量的酸則會(huì )在甲基橙的指示下用碳酸鈉。滴定所得的結果乘以特定的轉換因子就可以得到結果。
凱氏定氮儀適用范圍:
格丹納凱氏定氮儀廣泛應用于食品、谷物、飼料、藥品、種子、水、土壤、淤泥、肥料、煙草、沉淀物和化學(xué)品中的總氮的的含量檢測,在農產(chǎn)品檢測中心、農業(yè)技術(shù)推廣站、食品企業(yè)、谷物和豆制品企業(yè)、飼料企業(yè)、煙草公司、無(wú)機化工企業(yè)中廣泛應用。。具有相當好的性?xún)r(jià)比,格丹納N310自動(dòng)凱氏定氮儀自帶冷卻功能無(wú)需安裝冷卻循環(huán)水機與水龍頭,節省大量水資源及成本,非常適合實(shí)驗室及檢驗機構常規檢測。廣泛用于食品、農作物、種子、土壤、肥料等樣品的含氮量或蛋白質(zhì)含量分析。
凱氏定氮儀功能特點(diǎn)
1、免水冷凝技術(shù)
基于DDP(DualDragonPole)二代免水冷凝器技術(shù),儀器無(wú)需使用自來(lái)水冷卻,高水溫、零水壓也能有效冷凝。無(wú)需專(zhuān)門(mén)配置水龍頭和冷水機,可在實(shí)驗室內自由擺放,節約寶貴的實(shí)驗室空間。樣品量大的實(shí)驗室每臺儀器每年節約用水1200噸。
2、數據準確重現
蒸汽溫度監控,保證各樣品的蒸餾時(shí)間真實(shí)一致;采用蒸汽穩定技術(shù),使測量高重復性;恒壓流路系統:恒壓加液,確保更準確更穩定的加樣精度;1℃冷凝,水蒸汽與氨瞬間液化吸收,無(wú)損失。
3、方便靈活自動(dòng)化
真彩觸摸屏操作,流程顯示,簡(jiǎn)便快捷;自動(dòng)加酸,自動(dòng)加堿,自動(dòng)蒸餾,自動(dòng)淋洗;蒸餾功率可調,研究型實(shí)驗室的實(shí)用功能。
4、頂級的工藝制造
采用歐盟CE認證壓力泵與閥門(mén);圣戈班品牌進(jìn)口管材;突破性免水冷凝技術(shù)。
凱氏定氮儀技術(shù)參數
測定范圍:≥0.1mgN
回收率:≥99.5%測定速度:蒸餾時(shí)間3-10分鐘/樣品
重復性:≤0.5%
峰值功率:2.5kw
功率調節范圍:1kw-2kw
凱氏定氮儀相關(guān)應用標準
凱氏定氮儀主要應用在哪些方面:
凱氏定氮儀是測定樣品中含氮量的基本儀器,在當前社會(huì )發(fā)展的過(guò)程中,使用范圍非常廣泛,在各行各業(yè)中都有重要的應用。而隨著(zhù)近年來(lái)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,凱氏定氮儀具備安全、準確、可靠、省時(shí)、省力、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn),在當前的測定工作中,發(fā)揮了重要的作用。凱氏定氮儀主要應用在以下幾個(gè)方面:
1.蛋白質(zhì)測定
格丹納凱氏定氮儀可用于國家標準方法中,食品中的蛋白質(zhì)測定、飼料中粗蛋白質(zhì)的測定、植物油料中粗蛋白質(zhì)的測定、谷元蛋白粉的測定等。
2.氮的測定
凱氏定氮儀還可用于國家標準中,乳與乳制品中非蛋白氮含量的測定、淀粉及其衍生物氮含量的測定、土壤中氮含量的測定、復混肥料中總氮含量的測定、肥料中銨態(tài)氮含量的測定、尿素的測定等。另外也有使用凱氏定氮儀測定水中氨氮、天然橡膠氮含量和醬油中銨鹽含量的案例。
3.揮發(fā)性鹽基氮測定
還有人利用凱氏定氮儀測定金槍魚(yú)肉中的揮發(fā)性鹽基氮含量,肉類(lèi)中的揮發(fā)性鹽基氮含量,魚(yú)粉中的揮發(fā)性鹽基氮含量,也就是利用凱氏定氮儀測定水產(chǎn)品、肉及其制品中的揮發(fā)性揮發(fā)性鹽基氮含量及不確定度評定等。
另外也有出現應用凱氏定氮儀測定水發(fā)產(chǎn)品中甲醛的含量、黃花菜中二氧化硫的含量、己內酰胺中揮發(fā)堿等。由此可見(jiàn)凱氏定氮儀的應用范圍非常廣泛。
凱氏定氮儀實(shí)例
凱氏方法測定面包和烘烤類(lèi)食品中蛋白質(zhì)的含量
方法:
1、樣品:將樣品粉碎,稱(chēng)取2g干燥樣品,精度為0.1mg,放在消化管內。
2、消化用的催化劑:
加在每一個(gè)放有試樣的消化管內:7g硫酸鉀K2SO4、0.21g五水硫酸銅和0.21g二氧化鈦、12ml濃硫酸H2SO4(98%)輕輕搖晃消化管,將其混勻。
3、消化:420℃下消化60分鐘。
4、冷卻:將消化管冷卻到50~60℃。
5、蒸餾:將消化管放在蒸餾裝置的位置上,選擇標準方法15按開(kāi)始鍵進(jìn)行蒸餾,實(shí)驗中的參數如下:
系數:5.7
稀釋水=75ml
H3BO3=30ml
NaOH=50ml
滴定液:HCl 0.2mol/L
6、參考:AOAC,“Officialmethodsofanalysis",method950.36
凱氏方法測定燕麥,大麥,玉米,大米和黑麥中蛋白質(zhì)的含量
方法:
1、樣品:將樣品粉碎,過(guò)20目篩子,如果要以干樣品表達最終結果,則應測定樣品的濕度,將樣品稱(chēng)至1g,精度為0.1mg,放在消化管內
2、消化用的催化劑:
加在每一個(gè)放有試樣的消化管內:7g硫酸鉀K2SO4、0.8g五水硫酸銅CuSO4、12ml濃硫酸H2SO4(98%)輕輕搖晃消化管,將其混勻。
3、消化:420℃下消化60分鐘
4、冷卻:將消化管冷卻到50~60℃
5、蒸餾:將消化管放在蒸餾裝置的位置上,選擇標準方法9按開(kāi)始鍵進(jìn)行蒸餾,實(shí)驗中的參數如下:
系數:6.25
稀釋水=50ml
H3BO3=30ml
NaOH=50ml
滴定液:HCl0.2mol/L
6、參考:AOAC,“Officialmethodsofanalysis",method979.09
凱氏方法測定谷物及種子中蛋白質(zhì)的含量
方法:
1、樣品:將樣品粉碎,過(guò)20目篩子,在105℃烘箱中烘干至恒重,為了能夠使結果準確,可以將樣品的重量稱(chēng)至1g樣品,精度為0.1mg,放在消化管內
2、消化用的催化劑:
加在每一個(gè)放有試樣的消化管內:7g硫酸鉀K2SO4、5mg硒粉、12ml濃硫酸H2SO4(98%)、5ml35%的雙氧水輕輕搖晃消化管,將其混勻。
3、消化:420℃下消化60分鐘
4、冷卻:將消化管冷卻到50~60℃
5、蒸餾:將消化管放在蒸餾裝置的位置上,選擇標準方法7按開(kāi)始鍵進(jìn)行蒸餾,實(shí)驗中的參數如下:
系數:6.25
稀釋水=50ml
H3BO3=30ml
NaOH=50ml
滴定液:HCl0.2mol/L
6、參考:AOAC,“Officialmethodsofanalysis",AOAC(ed.1990),VOl.2(method950.09)